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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔牙髓干原代細胞 | 組織來源 | 牙髓 |
英文名稱 | Rabbit Dental Pulp Stem Cells | 貨號 | YS-01X8141 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔牙髓干細胞分離自牙髓組織；牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似，牙冠部髓腔較大，稱髓室，牙根部髓腔較細小，稱根管，根尖部有小孔，稱根尖孔。牙髓組織主要包含、血管，淋巴和結締組織，還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細胞，其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異，出現(xiàn)不同的病理變化，在臨床上會表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時間較長后，轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥。間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織，具有很強的自我復制和多向分化潛能，具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力，運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔牙髓干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
細胞 | 白介素4抗體 |
早老素蛋白1+2抗體 | 補體因子B抗體 |
叉頭蛋白D4 | 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1抗體 |
單核細胞趨化蛋白5抗體 | 蛋白多糖3抗體 |
20號染色體開放閱讀框79抗體 | 心臟和嵴衍生蛋白2抗體 |
TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) | NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087 | 人表皮淋巴內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105) |
4T1(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H067人腎系膜細胞培養(yǎng)基100mL 人心肝成纖維細胞RNAHCF miRNA5 μg | XCL1 Others Canine 狗 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | NHEM.f Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL |
CM-R071大鼠輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 兔牙髓干原代細胞有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1抗體 |
人腦瘤細胞;SF17 大鼠肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠淋巴瘤細胞;EL4 |
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) | 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5 腎透明細胞腺癌，786-0細胞 A-375 [A375](惡性黑色素瘤細胞) |
CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) | 促進凋亡基因抗體 |
T淋巴細胞易位蛋白2抗體 | ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體 | 核仁蛋白3抗體 |
膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 | TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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