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兔心肌成纖維原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-19 13:15:56瀏覽次數(shù):26

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8144 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔心肌成纖維原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代心臟干細(xì)胞 HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞) U251 人膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 1ml/T75 LLC 小鼠肺癌細(xì)胞 BEL-7404 人肝癌細(xì)胞 小鼠原代卵泡膜細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

兔心肌成纖維細(xì)胞分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來,人們逐漸了解到非心肌細(xì)胞不僅對(duì)心肌細(xì)胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護(hù)作用,而且還具有自分泌和旁分泌功能,影響心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理功能;心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對(duì)心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(zhǎng)因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動(dòng)也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對(duì)心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。

英文名稱

Rabbit Cardiac   Fibroblast Cells

組織來源

心臟

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號(hào)

YS-01X8144

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:兔心肌成纖維細(xì)胞

組織來源:心臟

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔心肌成纖維原代細(xì)胞兔心肌成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔心肌成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

兔心肌成纖維原代細(xì)胞

小腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

胰島素受體底物p53蛋白抗體

植烷酰A羥化酶2相互作用蛋白抗體

間隙連接蛋白29抗體

巖藻糖1酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶抗體

粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體

跨膜通道蛋白8抗體

22號(hào)染色體開放閱讀框43抗體

無毛發(fā)蛋白抗體

SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

EDAR Others Human EDAR / DL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人肺成纖維細(xì)胞裂解物HPFL

CXADR Others Human CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

GFRA2 Others Mouse 小鼠 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

COL9A1 Others Human COL9A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

FOLH1 Others Mouse 小鼠 FOLH1 / GCPII / PSMA / NAALAD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

SELP Others Human SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-R085大鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

兔心肌成纖維原代細(xì)胞粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

SERPINB12 Others Mouse 小鼠 SerpinB12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) Rattus

B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)

TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞)

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

E1A激活基因刺激蛋白1抗體

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體

STK24 Others Human STK24 / MST3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

BOLA2蛋白抗體

P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體

G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體

SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

 


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