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兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

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更新時間:2025-05-19 12:58:37瀏覽次數(shù):26

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8446 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代食管上皮細胞 EL4(小鼠淋巴瘤細胞) THP-1 人急性單核細胞白血病細胞 1ml/T75 JeKo-1 人套細胞淋巴瘤細胞 HCC827 人非小細胞肺癌細胞 小鼠原代氣管平滑肌細胞

詳細介紹

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

兔外周血DC細胞分離自外周血,由外周血單核細胞誘導而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

英文名稱

Rabbit Peripheral   Blood Immature Dendritic Cells

組織來源

外周血

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X8446

細胞形態(tài)

圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

組織來源:外周血

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的兔外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔外周血樹突狀細胞經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)

小氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

整合素α7抗體

蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體

鈣通道L型α2多肽抗體

FSD1蛋白抗體

酸化髓樣細胞白血病-1抗體

巨噬細胞炎性蛋白抗體

眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體

2號染色體開放閱讀框61抗體

造血細胞激酶抗體

IL9 Others Human IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎皮膚成纖維細胞;HES 人胎盤滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)基 100mL

人肺動脈平滑肌細胞cDNAHPASMC cDNA

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

EFNB2 Others Mouse 小鼠 EFNB2 / EphrinB2 人細胞裂解液 (陽性對照)

HEXB Others Human Hexosaminidase B / HEXB 人細胞裂解液 (陽性對照)

MX-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺細胞Many   types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素HA1   (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R101大鼠腦動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

兔外周血樹突狀原代細胞 (未成熟DC細胞)酸化髓樣細胞白血病-1抗體

INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱擬桿菌

人椎間盤髓核細胞培養(yǎng)基 100mL

HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Hs888Lu細胞,人肺成纖維細胞 人腎癌細胞系(769-P),769-P細胞 人真皮微血管內(nèi)皮細胞-HDMEC-a

NCF2 Others Human NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

2號染色體開放閱讀框69抗體

單絲蛋白激酶1+2抗體

U251(人膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6

腦蛋白44抗體

孤菲肽/痛敏肽抗體

生長激素受體抗體

IL9 Others Human IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

 


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