詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×106cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔外周血淋巴原代細(xì)胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Rabbit Peripheral Blood Lymphocyte Cells | 貨號 | YS-01X8444 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
兔外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)是白細(xì)胞的一種,是體積小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系,按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T淋巴細(xì)胞(又名T細(xì)胞)、B淋巴細(xì)胞(又名B細(xì)胞)和自然殺傷(NK)細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,它們的初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后,T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,參與細(xì)胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等;而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,再分化為漿細(xì)胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié);NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),具有殺傷靶細(xì)胞的作用。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔外周血淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品:
小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基SAEpiCM | 白介素7抗體 |
蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體 | L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 | 酸化雙微體2癌基因抗體 |
CD72蛋白抗體 | EYA4蛋白抗體 |
白細(xì)胞抗原CD97 alpha 抗體 | 熱休克蛋白56抗體 |
CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | WL1(大鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml |
人肺動脈平滑肌細(xì)胞總RNAHPASMC NA | PLA2G2E Others Mouse 小鼠 PLA2G2E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
293A (人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人支氣管上皮細(xì)胞RNAHBEpiC miRNA5 μg | CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501 人滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔外周血淋巴原代細(xì)胞酸化雙微體2癌基因抗體 |
HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi | PDGFC Others Human 人 PDGF-C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 人軟組織纖維瘤細(xì)胞,TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(食管癌細(xì)胞) | 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 |
LIN7C蛋白抗體 | HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
腦蛋白44樣蛋白抗體 | 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 |
腦腸肽抗體 | CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |