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兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8006 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔輸尿管上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代氣管上皮細(xì)胞 CHO(倉(cāng)鼠細(xì)胞) Ca SKi 人細(xì)胞 1ml/T75 HGC-27 人胃癌細(xì)胞(未分化) PC-3 人前列腺癌細(xì)胞 小鼠原代腎成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔輸尿管上皮采用先蛋白酶消化、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱(chēng)

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

組織來(lái)源

尿道

英文名稱(chēng)

Rabbit Ureteral Epithelial Cells

貨號(hào)

YS-01X8006

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔輸尿管上皮細(xì)胞分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,下連膀胱,是一對(duì)細(xì)長(zhǎng)的管道,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個(gè)狹窄部:一個(gè)在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個(gè)在越過(guò)小骨盆入口處;后一個(gè)在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段,也可稱(chēng)為腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動(dòng)脈處;盆段,自髂動(dòng)脈到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開(kāi)口。輸尿管管壁分為4層,黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細(xì)胞;固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成;外膜為疏松結(jié)締組織,營(yíng)養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中,輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層。

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔輸尿管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作步驟:

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周?chē)疂n吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀(guān)察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀(guān)察。

公司產(chǎn)品:兔輸尿管上皮原代細(xì)胞


U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 母細(xì)胞瘤細(xì)胞,LAN-6細(xì)胞 COS-7(SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)

谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1抗體

ras癌基因家族RAB20抗體

細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體

酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

單鏈結(jié)合蛋白70抗體

上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7

凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體

心肌肌凝蛋白(平滑肌) 小鼠單抗

肌鈀蛋白抗體

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino

CM-R046大鼠腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞 WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)

小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16

小鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

CM-M041小鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

CL-0172NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 mouse myeloma cell line [NS-1] DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

兔輸尿管上皮原代細(xì)胞單鏈結(jié)合蛋白70抗體

肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CL-0426RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

COLO 205(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細(xì)胞;BRL

HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

絲消旋酶

范可尼貧血組蛋白A抗體

人腎癌細(xì)胞;A498

乙酰肝素酶2抗體

白介素2抗體(人)

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino

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