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兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

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更新時間:2025-05-18 16:42:09瀏覽次數(shù):30

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產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7860 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞公司出售的產品:大鼠原代皮層元細胞 CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) OVCAR-3 人腺癌細胞 1ml/T75 Hep 3B 人肝癌細胞 NCI-H1688 人經典小細胞肺癌細胞 小鼠原代腎臟巨噬細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔視網(wǎng)膜微血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔視網(wǎng)膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

組織來源

視網(wǎng)膜

英文名稱

Rabbit Retinal Microvascular Endothelial Cells

貨號

YS-01X7860

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔視網(wǎng)膜微血管內皮細胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節(jié)細胞層、纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經由視到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內皮細胞具有內屏障的功能,在調節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):內皮細胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔視網(wǎng)膜微血管內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產品:兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞

小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA

叉頭相關轉錄因子C2抗體

糖皮質激素調節(jié)元件結合蛋白1抗體

髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體

乙酰A結合蛋白抗體

FBXO27蛋白抗體

酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

叉頭相關轉錄因子C2抗體

FBXO27蛋白抗體

髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體

GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 人小氣道平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL

人肺鱗癌細胞;NCI-H520

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

BTN3A3 Others Human 人 BTN3A3 人細胞裂解液 (陽性對照)

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照)

M453細胞,人癌細胞 鼠肉瘤細胞,S-180-S2D9細胞 卵巢癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

CM-R117大鼠視網(wǎng)膜muller細胞100mL

兔視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞FBXO27蛋白抗體

MG-63細胞,骨肉瘤細胞 人鼻咽癌細胞,CNE細胞 CL-0248ZR-75-30(人癌細胞)5×106cells/瓶×2

人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7

KP-N-NS 人腎上腺母細胞瘤(腦轉移)

KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)

弗林蛋白酶抗體

酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

SGC7901細胞,人低分化胃癌細胞 轉染了tk基因的SW038-C2細胞,SW038-C2-tk細胞 長尾綠猴腎細胞;4647

糖皮質激素調節(jié)元件結合蛋白1抗體

乙酰A結合蛋白抗體

弗林蛋白酶抗體

GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

 




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