化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔視乳頭星形膠質(zhì)采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔視乳頭星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔視乳頭星形膠質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 眼球 |
英文名稱 | Rabbit Optic Papilla Astrocyte Cells | 貨號 | YS-01X8434 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自視乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視纖維聚合組成視的起始端，它沒有視細(xì)胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位，星形膠質(zhì)細(xì)胞是視乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型，可為視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視病變是全球不可逆性致肓眼病。青光眼視病變以視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機(jī)制尚未闡明，膠質(zhì)細(xì)胞對調(diào)控元微環(huán)境起多重作用，越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質(zhì)，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好，明顯不同于長梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài)。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
AMS2細(xì)胞，人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株 阪崎腸桿菌 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3 | 酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 |
酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 | 椎骨蛋白2抗體 |
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 | 酸化三酸腺檸檬酸裂解酶抗體 |
轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 | 酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 |
酸化三酸腺檸檬酸裂解酶抗體 | 椎骨蛋白2抗體 |
IL8 Protein Canine 重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白 | KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞(彝族) |
CM-H099人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化) |
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 |
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人虹膜色素上皮細(xì)胞裂解物HIPEpiCL |
FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line FO DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 兔視乳頭星形膠質(zhì)原代細(xì)胞酸化三酸腺檸檬酸裂解酶抗體 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2 | CA10 Others Human 人 CA10 / CARPX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
14. 心臟細(xì)胞系統(tǒng) | CM-M008小鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 |
轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 | CL-0441SK-N-BE(2) (人母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 | 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 | IL8 Protein Canine 重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白 |
化工儀器網(wǎng)