详细介绍
兔肾脏巨噬原代细胞
兔肾脏巨噬细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。
英文名称 | Rabbit Renal Macrophage Cells | 组织来源 | 肾 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8431 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:兔肾脏巨噬细胞
组织来源:肾
产品规格:5×10?Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:巨噬细胞样
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:(12mM)
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肾脏巨噬细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔肾脏巨噬采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔肾脏巨噬经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49) | 脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体 |
G蛋白偶联胆汁酸受体1 | 载脂蛋白C3抗体 |
二酸腺苷核糖基化因子核苷酸交换因子2抗体 | 微管相关蛋白FAM82B抗体 |
血管紧张素III抗体 | 脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体 |
微管相关蛋白FAM82B抗体 | 载脂蛋白C3抗体 |
人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) | IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人肺微血管内皮细胞cDNAHPMEC cDNA | GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
hCD133+-CB-c single donor 从脐带血提取的人类CD133+祖细胞(hCD133+-CB),单一捐献者 100000 大鼠垂体细胞RPC | PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人心肌细胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠视网膜节细胞 Mouse | GSK3B Others Human 人 GSK3B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
CSC, 小鼠心肌细胞 | 兔肾脏巨噬原代细胞微管相关蛋白FAM82B抗体 |
CLCF1 Others Human 人 N1 / CLCF1 / CLC 人细胞裂解液 (阳性对照) | 615小鼠癌瘤株;Ca763 |
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0 | PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SW 982 [SW-982, SW982]人滑膜肉瘤细胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBS | 滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体 |
血管紧张素III抗体 | FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照) |
G蛋白偶联胆汁酸受体1 | 二酸腺苷核糖基化因子核苷酸交换因子2抗体 |
滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体 | 人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。