詳細介紹
兔神經(jīng)干原代細胞
兔干細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是元胞體集中的地方。內部則是由纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。干細胞具有分化為元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有組織中,不同的干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩(wěn)定的干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。干細胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成球,球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,培養(yǎng)條件不變。
英文名稱 | Rabbit Neural Stem Cells | 組織來源 | 腦 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7997 |
細胞形態(tài) | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:兔神經(jīng)干細胞
組織來源:腦
產品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):球形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔干細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔干采用消化后差速貼壁,結合干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
人結直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠腎小管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 酸化細胞角蛋白18抗體 |
酸化紅細胞生成素受體抗體 | 轉移生長因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ,TGFβRⅠ) |
腫瘤易感基因101蛋白抗體 | 酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 |
轉化生長因子β4抗體TGF β4 | 酸化細胞角蛋白18抗體 |
酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 | 轉移生長因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ,TGFβRⅠ) |
MLTC-1 小鼠間質細胞瘤細胞 | 大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs) |
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | NG108-15 大鼠小鼠雜合膠質瘤細胞 |
H4 人膠質細胞瘤 | TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 |
Raji,人Butt's淋巴瘤細胞 | 人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L |
RKO-E6人結腸癌轉基因細胞 Human colon cancer RKO-E6 ansgenic cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 兔神經(jīng)干原代細胞酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 |
人母細胞瘤細胞;BE(2)-M17 | 人肝永生化細胞;THLE-3 人心臟微血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-M002小鼠肺血管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 Rattus | 酸化周期素依賴性激酶2抗體 |
轉化生長因子β4抗體TGF β4 | 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 |
酸化紅細胞生成素受體抗體 | 腫瘤易感基因101蛋白抗體 |
酸化周期素依賴性激酶2抗體 | MLTC-1 小鼠間質細胞瘤細胞 |