詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔三叉元采用消化法結(jié)合元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔三叉元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔三叉神經(jīng)元原代細(xì)胞 | 組織來源 | 三叉神經(jīng) |
英文名稱 | Rabbit Trigeminal Neuron Cells | 貨號(hào) | YS-01X8422 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔三叉元細(xì)胞分離自三叉組織;三叉為粗大的混合性腦,含一般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉運(yùn)動(dòng)核,纖維組成三叉運(yùn)動(dòng)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內(nèi)側(cè),后進(jìn)入三叉第3支下頜中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜分支分布于咀嚼肌等。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉中腦核有關(guān)的纖維,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺。三叉內(nèi)以軀體感覺纖維為主,這些纖維的細(xì)胞體位于三叉節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉節(jié)由假單極元組成,其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉感覺根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉諸感覺核,其中傳導(dǎo)痛溫覺的纖維主要終止于三叉脊束核;傳導(dǎo)觸覺的纖維主要終止于三叉腦橋核。三叉節(jié)細(xì)胞的周圍突組成三叉三大分支,即第1支眼、第2支上頜、第3支為下頜。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導(dǎo)痛、溫、觸等多種感覺。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):元細(xì)胞樣
傳代特性:屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔三叉元細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1 | 組織激活過氧化酶活化增生受體γ蛋白抗體 |
G蛋白γ13/Gγ13 抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 |
肌側(cè)索硬化蛋白2抗體 | Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶10抗體 | 組織激活過氧化酶活化增生受體γ蛋白抗體 |
Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 |
人表皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) | HBL-100(人整合SV40基因的上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2 |
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 | 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 ) |
RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
TE-13(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | CCD-1095Sk細(xì)胞,人浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 鼠肝癌細(xì)胞,H22-H8D8細(xì)胞 腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);KM934 | 兔三叉神經(jīng)元原代細(xì)胞Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 |
HEC-1-B細(xì)胞,子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞(高分化),CNE1細(xì)胞 CL-0257BC-009(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人口腔角質(zhì)細(xì)胞RNAHOK miRNA5 μg |
皮膚癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml | ADA Others Human 人 ADA / Adenosine deaminase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 鐵蛋白輕鏈抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶10抗體 | 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0 食管癌細(xì)胞,TE-1細(xì)胞 PK-15細(xì)胞,豬腎細(xì)胞系 |
G蛋白γ13/Gγ13 抗體 | 肌側(cè)索硬化蛋白2抗體 |
鐵蛋白輕鏈抗體 | 人表皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) |