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兔乳腺上皮原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-18 16:09:23瀏覽次數(shù):23

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7106 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔乳腺上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞) 內(nèi)膜上皮細(xì)胞 COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human 小鼠原代胰腺星狀細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

組織來源

乳腺組織

英文名稱

Rabbit Mammary Epithelial Cells

貨號(hào)

YS-01X7106

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細(xì)胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長(zhǎng)因子共同調(diào)控,其中乳腺表達(dá)的生長(zhǎng)因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細(xì)胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔乳腺上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作步驟:

兔乳腺上皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:兔乳腺上皮原代細(xì)胞


小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7

舌癌耐藥相關(guān)蛋白1

G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體

酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體

腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體

5脂氧合酶激活蛋白抗體

腺苷酸環(huán)化酶6抗體

舌癌耐藥相關(guān)蛋白1

5脂氧合酶激活蛋白抗體

酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺支氣管癌細(xì)胞;NCI-H1650

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MEP1A Others Mouse 小鼠 MEP1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CLEC5A Others Rat 大鼠 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CD5 Others Human 人 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-01

兔乳腺上皮原代細(xì)胞5脂氧合酶激活蛋白抗體

LILRB2 Others Human 人 LILRB2 / ILT4 / LIR-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HIC(人小腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild

IL18RAP Others Human 人 IL18RAP / IL1R7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 人腎癌Wilms,G-401細(xì)胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞)

果糖1,6-二酸酯酶抗體

腺苷酸環(huán)化酶6抗體

IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體

腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體

果糖1,6-二酸酯酶抗體

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)


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