詳細(xì)介紹
兔前列腺基質(zhì)原代細(xì)胞
兔前列腺基質(zhì)細(xì)胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時(shí),排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學(xué)上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生,是前列腺中常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變,結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細(xì)胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段,其生長潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,終形成前列腺增生?;|(zhì)細(xì)胞是器官中結(jié)締組織細(xì)胞,起到為器官中實(shí)質(zhì)細(xì)胞提供支持和營養(yǎng)的作用,成纖維細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及周皮細(xì)胞都是常見的基質(zhì)細(xì)胞類型?;|(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的相互作用在腫瘤細(xì)胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)前列腺基質(zhì)細(xì)胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
英文名稱 | Rabbit Prostate Stromal Cells | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8417 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔前列腺基質(zhì)細(xì)胞
組織來源:前列腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔前列腺基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺基質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP | FAM50A蛋白抗體 |
溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 |
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體 | 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 |
蛋白激酶A2抗體 | FAM50A蛋白抗體 |
尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 |
CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721 | (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 | |
GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì) | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM932 | 兔前列腺基質(zhì)原代細(xì)胞尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 |
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 |
犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR | FAS Others Mouse 小鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮細(xì)胞型) |
蛋白激酶A2抗體 | ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體 | 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體 |
脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮細(xì)胞型) | CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。