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兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-16 11:11:19瀏覽次數(shù):27

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8397 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代胰腺星狀細(xì)胞 人胰腺癌耐藥 英文名稱: PATU-8988/FU 人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞 100mL 氣道平滑肌細(xì)胞 大鼠原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦靜脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

組織來(lái)源

腦靜脈

英文名稱

Rabbit Brain   Venous Vascular Smooth Muscle Cells

貨號(hào)

YS-01X8397

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦靜脈組織;與腦動(dòng)脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒(méi)有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢(shì)能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈;小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

培養(yǎng)信息:

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞

CM-R075大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

酸化微管相關(guān)蛋白抗體

酸化谷受體2A+2B抗體

轉(zhuǎn)錄因子TBX6抗體

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體

酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

豬藍(lán)耳病M蛋白抗體

酸化微管相關(guān)蛋白抗體

酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

轉(zhuǎn)錄因子TBX6抗體

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞

VERO細(xì)胞衍生株;SVP

CGM1細(xì)胞,EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E

人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

HEL1 人胚肺成纖維樣細(xì)胞()

IL11 Protein Human 重組人 IL11 / Ierleukin 11 / IL-11 蛋白

P3-X63-Ag8.653細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Ana-1(巨噬細(xì)胞) 人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

VEGFA Protein Canine 重組狗 VEGF / VEGFA 蛋白

人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 )

RWPE-1人正常前列腺上皮細(xì)胞   RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml   EGF

小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

SF9, 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞

酸化真核延伸因子激酶2抗體

豬藍(lán)耳病M蛋白抗體

RN-c, 大鼠皮質(zhì)元 Rattus

酸化谷受體2A+2B抗體

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體

酸化真核延伸因子激酶2抗體

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞

 



操作步驟:

兔腦靜脈血管平滑肌原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周?chē)疂n吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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