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兔角膜內(nèi)皮原代細胞

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更新時間:2025-05-16 10:41:25瀏覽次數(shù):42

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X6997 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔角膜內(nèi)皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代腎成纖維細胞 小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞 英文名稱: DCS 人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒 人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng) 大鼠冠狀動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 前列腺成纖維細胞 大鼠原代氣管上皮細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的兔角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE(元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

組織來源

眼角膜組織

英文名稱

Rabbit Corneal   Endothelial Cells

貨號

YS-01X6997

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔角膜內(nèi)皮細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細胞是角膜內(nèi)層的單層細胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細胞功能出現(xiàn)紊亂,常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實質(zhì)層相對脫水狀態(tài),維持透明性。

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔角膜內(nèi)皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔角膜內(nèi)皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:兔角膜內(nèi)皮原代細胞


小鼠腦脊元MN-r

乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體

G蛋白偶聯(lián)受體103抗體

酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

相關(guān)蛋白AKAP抗體

Fas活化的絲/蘇激酶抗體

α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體

乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體

Fas活化的絲/蘇激酶抗體

酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照)

C2 Others Human C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人骨肉瘤細胞;HOS

人成纖維細胞(HMF)(5×105)

HGC-27(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) 人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C

FST Others Human FST / Follistatin ( FS288 ) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CD27 Others Human CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照)

HAoSMC Pellet 人主動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人無色素睫狀上皮細胞裂解物HNPCEpiCL

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002

兔角膜內(nèi)皮原代細胞Fas活化的絲/蘇激酶抗體

DDR1 Others Human DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

MRC-5(人胚肺成纖維細胞 ) 5×106cells/瓶×2

VLcop細胞,人前列腺癌細胞 小鼠肺腺癌細胞系,LA795細胞 小鼠淋巴成纖維細胞MLF

CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體

α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體

人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5 人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL

G蛋白偶聯(lián)受體103抗體

相關(guān)蛋白AKAP抗體

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照)

 

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