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詳細介紹
兔呼吸道上皮原代細胞
兔呼吸道上皮細胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內表面覆蓋著黏膜，黏膜內分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成?？瓷先ハ駨蛯由掀?，但實際上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
英文名稱 | Rabbit Respiratory Epithelial Cells | 組織來源 | 呼吸道 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8367 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔呼吸道上皮細胞
組織來源：呼吸道
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔呼吸道上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔呼吸道上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1 | TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端補體復合物C5b-9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
chemerin： 趨化素抗體 0.1ml | GAS 6： 生長停滯特異性蛋白6抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CDKN2D/p19 INK4d 細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2D抗體 規(guī)格 0.2ml | Phospho-PPAR Gamma (ser273)： 0酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ 0.1ml |
Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) /FITC 熒光素標記0酸化谷受體2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受體β抗原 0.5mg |
IgM/Gold 金標記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MelanA： 黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體 0.1ml |
PRC1 Others Human 人 PRC1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | EFNA3 Others Mouse 小鼠 EFNA3 / Ephrin-A3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人海馬趾星形膠質細胞cDNAHA-h cDNA | CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SMOC1 Others Human 人 SMOC1 人細胞裂解液 (陽性對照) | PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
OVCAR-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Pig MSC豬骨髓間質干細胞 Pig MSC of porcine bone marrow mesenchymal stem cells DMEM低糖+10% FBS+glutamin |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao | 兔呼吸道上皮原代細胞Phospho-PPAR Gamma (ser273)： 0酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ 0.1ml |
MCF7細胞，人癌細胞 人導管癌細胞,HCC38細胞 髓核細胞生長添加物NPCGS | 人結直腸腺癌細胞;HT-29 |
615小鼠癌瘤株;Ca763 | ROBO4 Others Mouse 小鼠 ROBO4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-17F/IL-24/FITC 熒光素標記白介素-17F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-SARS putative orflab polyprotein 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-p56Dok2(Tyr351) 0酸化D酪激酶衰減蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh Kif14 protein 驅動蛋白家族Member14蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 96T | PRC1 Others Human 人 PRC1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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