詳細(xì)介紹
兔骨髓單核原代細(xì)胞
兔骨髓單核細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Monocyte Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7068 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔骨髓單核細(xì)胞
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
B95-8細(xì)胞,EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,CL187/CCL187細(xì)胞 CM-H125人腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2 96T |
RNF128: 環(huán)指蛋白128抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTP1B 蛋白酪0酸酶-1B 規(guī)格 0.1ml |
Anti-HER3/ErbB3 /FITC 熒光素標(biāo)記HER3受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CCDC47: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
纖維母細(xì)胞生長因子受體1抗體 Anti-FGFR1 0.1ml | AKAP13: 蛋白激酶錨定蛋白13抗體 0.1ml |
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A | 大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HMy2.CIR人B淋巴母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS | FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] | 倉鼠腎細(xì)胞;HL-1 |
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 | CL-0127JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
VERO細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H661細(xì)胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 兔骨髓單核原代細(xì)胞CCDC47: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76 | 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910 真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 牛腎細(xì)胞;MDBK |
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗體 規(guī)格 0.2ml | 人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg |
ETFB: 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體 0.2ml | Anti-M2-PK/PKM2 酸激酶-M2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。