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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔睪丸支持原代細胞 | 組織來源 | 睪丸 |
英文名稱 | Rabbit Sertoli Cells | 貨號 | YS-01X7858 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔睪丸支持細胞分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細胞，如胰島和細胞提供營養(yǎng)支持，而且當其與胰島或細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供免疫保護，提高植活率。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔睪丸支持細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
TE-10細胞，人食管癌細胞 人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1 | Rhesus antibody Rh GDF9 生長分化因子9抗體 規(guī)格 0.1ml |
HP-CagA-IgG(Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG) ELISA Kit 人幽門螺桿菌細胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
phospho-IKKi(Thr501)： 0酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 0.1ml | NSE ELISA Kit 大鼠特異性烯醇化酶 96T |
Rhesus antibody Rh Reprimo 細胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Leptin/FITC 熒光素標記瘦素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin(Ser25) 0酸化原癌基因蛋白18 規(guī)格 0.1ml | P-cad(Human Placenta Cadherin) ELISA Kit 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白 96T |
Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | CM-R072大鼠腎管狀上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 Mouse |
人羊膜細胞;WISH | 人胚肺二倍體細胞;KMB-17 |
CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL |
犬胸腺細胞;cf2Th SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞，SRSV/3T3細胞 CCC-Ca761-03細胞，小鼠癌細胞 | 兔睪丸支持原代細胞NSE ELISA Kit 大鼠特異性烯醇化酶 96T |
CL-0201S-180(小鼠肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H097人椎間盤髓核細胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | Rhesus antibody Rh APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml |
phospho-Bax (Thr167)： 0酸化Bax抗體 0.1ml | HFL1 人肺成纖維細胞 |
Anti-TPH /FITC 熒光素標記色羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PROK2： 前動力蛋白2抗體 0.2ml |
Anti-CDK4/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
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