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兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7983 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞) EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞 英文名稱: Peng 人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 海馬元細(xì)胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

兔肝外膽管上皮細(xì)胞分離自肝外膽管組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等,都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位,引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對(duì)研究膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。

英文名稱

Rabbit   Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells

組織來源

膽管

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號(hào)

YS-01X7983

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:兔肝外膽管上皮細(xì)胞

組織來源:膽管

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔肝外膽管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝外膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e 大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

Activin A Receptor Type IC: 激活素受體1C抗體 0.2ml

Anti-HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh A Raf/ARAF A-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Hyaluronidase2 透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原) 0.5mg

Hrasls3 HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml

Goat Anti-Guinea IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

Rhesus antibody Rh Factor X 10抗體 規(guī)格 0.2ml

H22 小鼠肝癌細(xì)胞

CL-0453TE-10(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM   BB325]細(xì)胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纖維細(xì)胞)

人細(xì)胞;C-33A

人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A

人淋巴細(xì)胞;1301

原代表皮角化細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞,BALB/3T3細(xì)胞 RYTF細(xì)胞,兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞Rhesus   antibody Rh Hyaluronidase2 透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1

CD47 Others Human CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC

人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC

NSC,大鼠干細(xì)胞

Rhesus antibody Rh IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.5ml

GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse   platelet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba 96T

U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Human C-Peptide ELISA Kit CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

MAML2: 主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體 0.2ml

H22 小鼠肝癌細(xì)胞

 

兔肝外膽管上皮原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。


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