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兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

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更新時間:2025-05-16 09:54:15瀏覽次數(shù):21

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7208 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細胞 小鼠骨髓基質(zhì)細胞 英文名稱: OP9 人星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒 人星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng) 大鼠胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 元細胞 雞原代骨骼肌細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮細胞 經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

組織來源

膽管組織

英文名稱

Rabbit   Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells

貨號

YS-01X7208

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔肝內(nèi)膽管上皮細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明,常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位,進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞


大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 肝癌細胞,SMMC-7721細胞 ECA細胞,小鼠艾氏腹水瘤細胞

TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor   Beta) ELISA KIT 小鼠壞死因子β 96T

Rbms3: 抑癌基因Rbms3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PTPIP51/FAM82A2 蛋白酪0酸酶相互作用蛋白51抗體 規(guī)格   0.2ml

Anti-Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC 熒光素標記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

CCDC46: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Borealin/CDCA8 細胞分裂周期蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-CXCL16/FITC 熒光素標記CXC趨化因子16抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

成纖維細胞生長因子-10/纖維母細胞生長因子-10抗體 anti-FGF-10 0.2ml

Allergin-1: 肥大細胞膜抑制性受體Allergin1抗體 0.1ml

DU 145, 人前列腺癌細胞 Human

CM-H110人皮膚肥大細胞培養(yǎng)基100mL

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)

小鼠漿細胞瘤;MPC-11

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405

BC-021(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2

GP2-293Luc細胞,人胚腎上皮包裝細胞   綠猴恒河猴腎細胞,LLC-MK2細胞 CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))5×106cells/瓶×2

兔肝內(nèi)膽管上皮原代細胞CCDC46: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 0.2ml

非洲綠猴腎細胞;VERO

3T3TK細胞,小鼠成纖維細胞   TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞,JEG-3-VP16-TNFa細胞   人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937] 大鼠外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL

IgG/APC APC標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

Rhesus antibody Rh GRK1 G蛋白偶合受體激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

人上皮細胞;MCF-10A

E2F8: 轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 0酸化膜相關蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit   小鼠游離脂肪酸Multi-class antibodies規(guī)格:   48T

DU 145, 人前列腺癌細胞 Human

 

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