化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔腸黏膜上皮原代細胞 | 組織來源 | 腸 |
英文名稱 | Rabbit Intestinal Mucosal Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X8329 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔腸黏膜上皮細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腸黏膜上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)：
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
AML-12小鼠正常肝細胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS | ApoER2： 載脂蛋白E2受體抗體 0.1ml |
Anti-HPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰白酶抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Cbx8/FITC 熒光素標記染色質(zhì)結合蛋白Cbx8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IASPP 細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 規(guī)格 0.1ml |
Isulin 胰島素(抗原) 0.5mg | phospho-HP1 alpha (Tyr24)： 0酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) 1ml |
IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAF1 Fas相關1因子抗體 規(guī)格 0.1ml |
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽) | 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 |
MGC80-3細胞，胃癌細胞 人喉癌細胞,TU212細胞 正常大鼠腎細胞;NRK | 雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 |
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5 | 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414) |
大鼠甲狀腺上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2 |
Jurkat,Clone E6-1細胞，T淋巴細胞白血病細胞 人鼻咽癌細胞系,SUNE-1亞株13-9B細胞 CL-0346HBE(人支氣管上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2 | 兔腸黏膜上皮原代細胞Rhesus antibody Rh IASPP 細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 規(guī)格 0.1ml |
NCI-H2452(人間皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠細胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細胞，NG108-15[108CC15]細胞 LM8細胞，C3H小鼠骨肉瘤細胞 | 人牙周膜成纖維細胞HPLF |
MN-h, 小鼠海馬元 | Rhesus antibody Rh IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml |
CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit 人癌胚抗原 96T | THP-1人單核白血病細胞 |
14-3-3 protein 14-3-3 蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | Human Tri-iodothyronine ELISA Kit 人三碘甲狀腺原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MUL1： E3泛素連接酶MUL1抗體 0.2ml | EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽) |
化工儀器網(wǎng)