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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人直腸癌組織源經檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人直腸癌組織源原代細胞 | 組織來源 | 直腸癌組織 |
英文名稱 | Human Rectal Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7470 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人直腸癌組織源細胞分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見的一類。相對應的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關。癌細胞，是一種變異的細胞，是產生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂），還會局部侵入周圍正常組織甚至經由體內循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5 | NCR1： 細胞毒性受體NK-p46抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MCKD2/UMOD 尿調節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TSARG4/FITC 熒光素標記生精細胞凋亡相關基因4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗原 0.5mg | Anti-OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型0蛋白1)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-GADD153/FITC 熒光素標記生長抑制DNA損傷基因153抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC25A6 線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉運蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-PH-4/FITC 熒光素標記水解酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AT1/FITC 熒光素標記血管緊張素I抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人結直腸腺癌細胞;Caco-2 | USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) | CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CSF2RB Others Rat 大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
NRK-52E，大鼠腎細胞 | 人直腸癌組織源原代細胞Anti-OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型0蛋白1)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 Rattus |
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 | 人星形膠質細胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮層膠質細胞(EGFP標記) Mouse |
OK負鼠腎細胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | GSTCD： 硫轉移酶C段結構域抗體 0.2ml |
Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 人載脂蛋白A1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
褪黑素受體/松果體素受體抗體 Anti-MTR-1A 0.1ml | HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgG 96T |
AKAP5： A激酶錨定蛋白5抗體 0.2ml | CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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