詳細介紹
人脂肪原代細胞
人脂肪細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色)脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達到巔,此后數(shù)量一般不再增加。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
英文名稱 | Human Adipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7361 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人脂肪細胞
組織來源:脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人脂肪采用消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
人髓母細胞瘤細胞;D341Med 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | Rhesus antibody Rh Gentamicin(3G7) 慶大單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml |
TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml |
Inhibin beta A: 抑制素A/Inhibin βA抗體 0.1ml | TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素 96T |
Rhesus antibody Rh RFPL4A/RNF210 環(huán)指蛋白210抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b/FITC 熒光素標(biāo)記核糖體S6激酶RSK2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-SYT1(Ser309) 0酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml | CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit 人CXC趨化因子配體16 96T |
EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞 | mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 |
3T3TK細胞,小鼠成纖維細胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞,JEG-3-VP16-TNFa細胞 人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg | SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 |
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
Ⅱ型肺泡上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 人海馬趾星形膠質(zhì)細胞裂解物HA-h L |
SNU-739人肝癌細胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人脂肪原代細胞TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素 96T |
胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細胞裂解液 (陽性對照) |
DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H073人膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | Rhesus antibody Rh APH1a 早老素γ分泌酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
phospho-B Raf (Thr446 + Ser601): 0酸化B-Raf抗體 0.1ml | MDA-MB-436 人腺癌細胞 |
Anti-Sema3F/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | phospho-PLB(Ser16): 0酸化心臟0蛋白抗體 0.1ml |
Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞 |