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詳細介紹
人脂肪間充質干原代細胞
人脂肪間充質干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質干細胞，簡稱脂肪間充質干細胞。與骨髓間充質干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質干細胞更易獲得足夠數量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。
英文名稱 | Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7601 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人脂肪間充質干細胞
組織來源：脂肪組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人脂肪間充質干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人脂肪間充質干經CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5 | GP- II b III a/CD41+CD61 ELISA Kit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf146： 1號染色體開放閱讀框146抗體 0.2ml | GARP： 環(huán)0酸鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CEBP gamma 轉錄調節(jié)因子C/EBPγ抗體 規(guī)格 0.1ml | PCDH8： 原鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml |
Anti-NPM/FITC 熒光素標記核仁0酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FOS B FosB抗原 0.5mg |
Mose Anti-rat IgG/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MMP-1： 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml |
人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 ) | QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人結直腸腺癌細胞;COLO 205 | CD47 Others Human 人 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD38 Others Human 人 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人顱骨造骨細胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠腎細胞 Rattus | OVCaR-3細胞，人卵巢癌細胞 菜青蟲卵巢細胞,Pr-HNV8細胞 膠質細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
NSC，大鼠干細胞 | 人脂肪間充質干原代細胞PCDH8： 原鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml |
Jurkat D,E細胞，人T淋巴瘤轉基因細胞 615小鼠癌瘤株,Ca759細胞 多聚賴10 mg/mlPLL | 人角膜細胞裂解物HKL |
食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MS751(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細胞) | Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光素標記抗白介素14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 0酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | NCI-H358人非小細胞肺癌細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Ser178) 0酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體 規(guī)格 0.1ml |
TUNEL 細胞凋亡原位檢測試劑盒(我公司提供代測服務) 50人份 | 人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 ) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
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