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詳細(xì)介紹
人胸腺上皮原代細(xì)胞
人胸腺上皮細(xì)胞分離自胸腺組織；胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關(guān)，是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所，還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分，其外，胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu)，根據(jù)其在胸腺中位置不同，可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外，胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽(yáng)性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識(shí)別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份，其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性，與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體，部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察，可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型，用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型。
英文名稱 | Human Thymic Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 胸腺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7654 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人胸腺上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：胸腺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胸腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胸腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小型豬腎細(xì)胞;MPK | OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf162： 1號(hào)染色體開放閱讀框162抗體 0.2ml | GPR18： G蛋白偶聯(lián)受體18抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格 0.2ml | PRRSV： 豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病毒抗體 0.2ml |
Anti-Notch3/FITC 熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子)抗原 0.5mg |
IgG/Gold 金標(biāo)記小鼠抗人IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MMP2： 基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體 0.1ml |
CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IL17F Others Human 人 IL-17F / Ierleukin-17F 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) | SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) | CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
G-401(人腎癌Wilms細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腦膜細(xì)胞MMenC | Caov-3細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞 大鼠胰島素細(xì)胞,INS-1細(xì)胞 元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml) |
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B | 人胸腺上皮原代細(xì)胞PRRSV： 豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病毒抗體 0.2ml |
Jurkat77細(xì)胞，人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系 615小鼠癌瘤株,Ca761細(xì)胞 牛腦垂體提取物BPE | 人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC |
轉(zhuǎn)化細(xì)胞 | TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-IL-12R Beta2/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-12受體β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) 0酸化核糖體S6激酶RSK2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | PC-12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) HCT 116(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17 |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser360) 0酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13 規(guī)格 0.1ml |
Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I ) ELISA Kit 球蛋白A Fc段受體Ⅰ 96T | CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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