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詳細介紹
人小腦顆粒原代細胞
人小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織；元是系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)與功能單位，小腦顆粒元是體積較小的元，直徑約10μm，在中樞系統(tǒng)中含量非常豐富，近乎元數(shù)量的一半。由于小腦元的生長、分化和大腦皮層元相似，而且數(shù)量多、便于取材，因此小腦顆粒元是研究元生長發(fā)育、軸突再生及疾病發(fā)生機制和臨床藥理的重要手段。小腦顆粒元是小腦主要的中間元，在哺乳動物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富。顆粒元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系，形成小腦皮層內(nèi)的元環(huán)路，在小腦的活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒元，導致小腦皮層的元環(huán)路受損，從而呈現(xiàn)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發(fā)生的機理特別是分子機理，有賴于小腦顆粒元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導，這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設，小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。
英文名稱 | Human Cerebellar Granule Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7402 |
細胞形態(tài) | 元細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人小腦顆粒細胞
組織來源：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人小腦顆粒采用消化法結(jié)合元專用培養(yǎng)基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人小腦顆粒經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2 子宮鱗癌細胞(高分化)，HCC 94[HCC941122]細胞 S-180-S2D9細胞，鼠肉瘤細胞 | APBA2： β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β) 0.2ml |
Anti-PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABCA1/ABC1 腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Cav-1/FITC 熒光素標記抗小凹蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh Id1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體 規(guī)格 0.2ml |
AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原 0.5mg | H2N2 Hemagglutinin： 甲型流感病毒血凝素抗體(H2N2) 0.2ml |
IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM113A FAM113A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 | mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 |
NIH3T3細胞，NIH SWISS小鼠胚細胞 人前列腺癌細胞,ALVA細胞 人主動脈平滑肌細胞RNAHASMC miRNA5 μg | 恒河猴腎細胞;RM-2 |
CL-0298NCI-H1975(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠癌細胞;SHZ-88 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM932 |
T-24細胞，膀胱變移細胞癌細胞 人巨細胞白血病細胞株,Mo7e細胞 人肺腺癌細胞;Calu-3 | 人小腦顆粒原代細胞Rhesus antibody Rh Id1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體 規(guī)格 0.2ml |
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標簽) | THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞，骨髓瘤細胞 人結(jié)腸癌細胞,SW620細胞 CM-H053人子宮平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 人真皮血管平滑肌細胞HDVSMC |
lovo, 人結(jié)腸癌細胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/Cy7 Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1 96T | 大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] |
CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | i-PTH(Human intact Parathormone) ELISA Kit 人全段甲狀旁腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MLX： 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 0.2ml | 人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 |
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