化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞
人視網(wǎng)膜微血管內皮細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節(jié)細胞層、纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性，在腦和視網(wǎng)膜中，這些內皮細胞具有內屏障的功能，在調節(jié)血管生理狀態(tài)，釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。
英文名稱 | Human Retinal Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7412 |
細胞形態(tài) | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人視網(wǎng)膜微血管內皮細胞
組織來源：視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜微血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜微血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 | PEDF ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf127： 1號染色體開放閱讀框127抗體 0.2ml | GRM1： 促代謝型谷酸受體1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Cellulase 纖維素酶 規(guī)格 1ml | PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-Numb (Ser276)/FITC 熒光素標記0酸化膜相關蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GABAB1(GABAb Receptor 1) g-基B1受體(多肽) 0.5mg |
IgM/Gold 金標記羊抗小鼠IgM(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | MRP2： 多藥耐藥相關蛋白2抗體 0.1ml |
OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人淋巴內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg | 小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) |
GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 ) |
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) | LoVo細胞，人結腸癌細胞 HEK293,人胚腎上皮細胞,293A細胞 腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19 | 人視網(wǎng)膜微血管內皮原代細胞PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
HuH-7人肝癌細胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人間充質干細胞-骨髓裂解物HMSC-bm L |
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 | DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝細胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它 | Anti-IL-10R/CD210/FITC 熒光素標記白細胞介素-10受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) 0酸化S6核糖體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 大鼠癌細胞;MADB106 胃腺癌細胞，AGS細胞 SDBMSC細胞，SD大鼠骨髓間充質干細胞 |
Rhesus antibody Rh phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 0酸化上皮酪激酶抗體(癌激酶10) 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF9/BTEB1 轉錄因子KLF9抗體 規(guī)格 0.1ml |
RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細胞抗體 96T | OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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