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人食管平滑肌原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-15 10:09:37瀏覽次數(shù):87

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7129 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
人食管平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代皮膚癌組織源細(xì)胞 人腺癌細(xì)胞 英文名稱: MDA-MB-415 LA795 小鼠肺腺癌細(xì)胞 1ml/T75 人肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL WISH 人羊膜細(xì)胞 小鼠原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

人食管平滑肌原代細(xì)胞

人食管平滑肌原代細(xì)胞

人食管平滑肌細(xì)胞分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱為食管上括約??;位于食管下端,一部分在膈上,穿過膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

英文名稱

Human Esophageal   Smooth Muscle Cells

組織來源

食管組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X7129

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:人食管平滑肌細(xì)胞

組織來源:食管組織

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人食管平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

方法簡介

公司實驗室分離的人食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

人食管平滑肌原代細(xì)胞人食管平滑肌原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

人食管平滑肌原代細(xì)胞

人食管平滑肌原代細(xì)胞

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

NLRP7: 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh MCP-3/CCL7 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標(biāo)記酪激酶A.B.C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

TDP-43/TARDBP (tar DNA binding   protein) Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗原   0.5mg

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Anti-GABA /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗γ1氨基抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh SLC34A2 0酸協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體   規(guī)格 0.1ml

Anti-PEPT1/FITC 熒光素標(biāo)記腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標(biāo)記芳香化酶/細(xì)胞色素P450/P450抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

CSNK2A2 Others Human CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CD209B Others Mouse 小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人顱骨造骨細(xì)胞裂解物HCOL

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2   CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞)

CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

ME-180(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠   IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

IL17RC Others Human IL17RC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

T-102B-EDTA(100mL酶解緩沖液)10mL

人食管平滑肌原代細(xì)胞Anti-Oct-4(Octamer-4)   胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1   (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

KLK13 Others Human KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞,hFOB 1.19細(xì)胞 PIEC(豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞)

GABABR1 gammaB型受體1抗體 0.2ml

Human thrombin-antithrombin   complex,TAT ELISA Kit 人合物Multi-class   antibodies規(guī)格: 48T

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CD90抗體   Anti-Thy-1/CD90 0.1ml

M-AChR M3(Human music acetylcholine   receptor M3) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰受體亞型M3 96T

ABH8 AlkB同源蛋白8抗體 0.2ml

CSNK2A2 Others Human CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 

人食管平滑肌原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。




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