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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人食管癌組織源經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人食管癌組織源原代細胞 | 組織來源 | 食管癌組織 |
英文名稱 | Human Esophageal Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7433 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人食管癌組織源細胞分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見的一類。相對應的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關。癌細胞，是一種變異的細胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂），還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | CA-2 ELISA Kit 大鼠酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf129： 1號染色體開放閱讀框129抗體 0.2ml | GLRA4： 甘酸受體α4抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh cellulase 纖維素酶抗體 規(guī)格 1ml | PCDH12： 原鈣粘附蛋白12/血管內皮鈣粘蛋白2抗體 0.1ml |
Anti-NUMB/FITC 熒光素標記膜相關蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1基A型受體B2抗原 0.5mg |
IgG/Gold 金標記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | MRP3： 多藥耐藥相關蛋白3抗體 0.1ml |
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) | Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 原代內皮細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml |
人顱骨造骨細胞總RNAHCO NA | 小鼠背部脊髓元(MN-dsc)(1×106) |
S100A1 Others Human 人 S100A1 人細胞裂解液 (陽性對照) | BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠顆粒元(MGC)(1×106) 6-10B, 人鼻咽癌細胞系 Human | CNE人鼻咽癌細胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS |
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL | 人食管癌組織源原代細胞PCDH12： 原鈣粘附蛋白12/血管內皮鈣粘蛋白2抗體 0.1ml |
F98-RFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質瘤細胞 F98-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin | 人間充質干細胞-肝臟總RNAHMSC-hp NA |
人癌細胞;MDA-MB-453 | IL9R Others Rat 大鼠 IL9R / Ierleukin 9 receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-10/FITC 熒光素標記白介素10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RPS6 S6核糖體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | SMMC-7721細胞，人肝癌細胞 人退行性癌細胞,Calu-6細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 |
Rhesus antibody Rh phospho-Kv2.1(Tyr128) 0酸化通道蛋白DRK1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLH 血藍蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Fc GammaR III /CD16(Human Receptor III for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR III ) ELISA Kit 球蛋白G Fc段受體Ⅲ 96T | EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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