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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人腎皮質上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人腎皮質上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人腎皮質上皮原代細胞 | 組織來源 | 腎組織 |
英文名稱 | Human Renal Cortical Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7241 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人腎皮質上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
WI-38細胞， 人胚肺細胞 小鼠肺成纖維細胞,L929細胞 CL-00025637(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2 | CA-2 ELISA Kit 大鼠酶2 96T |
RNF11： 環(huán)指蛋白11抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rab25 癌基因RAS相關蛋白Rab25抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HDAC1/HD1/FITC 熒光素標記組蛋白去乙?；?span>1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C21orf128： 21號染色體開放閱讀框128抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRLF1 立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因) 規(guī)格 0.2ml | Anti-CTn1/FITC 熒光素標記心肌肌鈣蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
雌激素受體α抗體 Anti-ER-α 0.1ml | phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)： 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α2抗體 0.1ml |
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 人前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL |
MC細胞，大鼠巨噬細胞 THP-1(人單核細胞) 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A | EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽) |
成纖維細胞生長添加物FGS | 盤羊皮膚細胞;ASHS2 |
正常大鼠腎細胞;NRK | CL-0074DLD-1(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
Hs 578Bst細胞，人成纖維細胞 表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞,293FT細胞 胰腺星狀細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人腎皮質上皮原代細胞C21orf128： 21號染色體開放閱讀框128抗體 0.2ml |
多聚賴10 mg/mlPLL | 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
L W-3A(小鼠皮下結締組織細胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細胞) | MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人胚肺二倍體細胞;HL | IgM/PE PE標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GST tag/GSTM1 GST標簽蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | 人前列腺平滑肌細胞RNAHPSMC miRNA5 μg |
Phospho-HER2 (Tyr1222)： 0酸化HER2受體抗體 0.1ml | Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
INH-A(Mouse Inhibin) ELISA Kit 小鼠抑制素AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
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