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詳細介紹
人臍動脈內(nèi)皮原代細胞
人臍動脈內(nèi)皮細胞分離自臍帶組織；它是臍動脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。
英文名稱 | Human Umbilical Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 臍帶組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7293 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人臍動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：臍帶組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人臍動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人臍動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
胰腺導(dǎo)管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-TSARG6/DNAJB13 生精細胞凋亡相關(guān)基因6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α 96T | Anti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIP30 TIP30蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | TE(Human telomerase) ELISA Kit 人端粒酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HOXB5： 同源盒蛋白HOXB5抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC104 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體 規(guī)格 0.2ml |
Fibrillin 1： 原纖維蛋白1抗體 0.2ml | IL-9 ELISA Kit 大鼠白介素9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人皮膚成纖維樣細胞;HSF2 人子宮平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg | ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB ECD 人細胞裂解液 (陽性對照) | CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人前列腺癌細胞;LNCaP 大鼠肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | MMP2 Others Human 人 MMP-2 / CLG4A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6 | 人臍動脈內(nèi)皮原代細胞TE(Human telomerase) ELISA Kit 人端粒酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HTSMC-c 人類氣管平滑肌細胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | 人小腦顆粒細胞培養(yǎng)基 100mL |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A 人肺癌細胞，NCI-H1755[H1755]細胞 MGC80-3(胃癌細胞) |
CLMP Others Rat 大鼠 ASAM / CLMP 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-prox-1 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Omgp： 少突細胞髓0脂糖蛋白抗體 0.1ml | CNAP2 Others Mouse 小鼠 CNAP2 / CASPR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPHK1： 鞘醇激酶1抗體 0.2ml | CAMKK2： 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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