詳細介紹
人皮層神經(jīng)元原代細胞
人皮層元細胞分離自腦皮層組織;皮層元細胞是構成中樞系統(tǒng)結構和功能的基本單位。元是具有長突觸(軸突)的細胞,它由細胞體和細胞突起構成。在長的軸突上套有一層鞘,組成纖維,它的末端的細小分支叫做末梢。細胞體位于腦、脊髓和節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細胞體是細胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細胞中央,染色質少,核仁明顯。細胞質內有斑塊狀的核外染色質,還有許多元纖維。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,又可分為樹突和軸突。每個元可以有一或多個樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細胞體。每個元只有一個軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個元或其他組織,如肌肉或腺體。皮質元是大腦皮質的主要組成細胞之一,是大腦進行功能活動調節(jié)的基本單位,參與動物多種中樞系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學觀察顯示元從貼壁、伸出突起開始;突起逐漸增多,而后突起進一步增多并逐漸成網(wǎng),同時細胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細胞為豐滿,隨后元開始裂解,突起逐漸減少,細胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細胞變形。
英文名稱 | Human Cortex Neuron Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7385 |
細胞形態(tài) | 元細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人皮層神經(jīng)元細胞
組織來源:腦組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人皮層元采用消化法、元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人皮層元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
HuT 78細胞,人T細胞白血病細胞 小鼠漿細胞瘤,MPC-11細胞 上皮細胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf | Rhesus antibody Rh GHR 生長激素受體抗體 規(guī)格 0.1ml |
Human Cyclin-D3 ELISA Kit 人細胞周期素D3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGF1R: 胰島素樣生長因子I受體抗體 0.1ml | Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody) ELISA Kit 人抗0脂抗體 96T |
Rhesus antibody Rh Ribonuclease 6 核糖核酸酶6抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAIR-1/CD305/FITC 熒光素標記白細胞相關免疫球蛋白樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser721) 0酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T |
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | 猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1 |
BALB/3T3細胞,BALB/C小鼠胚成纖維細胞 人胰腺癌細胞,PC-2細胞 CM-M024小鼠淋巴成纖維細胞培養(yǎng)基100mL | 大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106 |
LCC1 人癌細胞 | EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽) |
原代內皮細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml | 小鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HCC1937人癌細胞 Human breast cancer cell line HCC1937 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 人皮層神經(jīng)元原代細胞Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody) ELISA Kit 人抗0脂抗體 96T |
人纖維肉瘤細胞;HT-1080 | Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml |
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H036人小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
CW-2(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh APOD 載脂蛋白D抗體 規(guī)格 0.2ml |
Brucella: 布氏桿菌菌體蛋白抗體 0.2ml | 白牦牛皮膚細胞;Yak-2 |
Anti-SUR1/FITC 熒光素標記磺酰脲類藥物受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Protein S: 蛋白S抗體 0.2ml |
Anti-CD160/By55/FITC 熒光素標記NK細胞受體BY55抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |