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詳細介紹
人腦靜脈血管平滑肌原代細胞
人腦靜脈血管平滑肌細胞分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈；小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢，進入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮，后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢，即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
英文名稱 | Human Brain Venous Vascular Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 腦靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7379 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腦靜脈血管平滑肌細胞
組織來源：腦靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腦靜脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
原代表皮角化細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | Anti-c/Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A 96T | Anti-MLK3 /FITC 熒光素標(biāo)記絲/蘇蛋白激酶MLK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIS11D/ERF2 表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml | iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-HDAC1 (Ser423+Ser421)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 規(guī)格 0.2ml |
factor VIII： 8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml | KAF/AR ELISA Kit 大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | TIE1 Others Human 人 Tie1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人腦瘤細胞;SF763 | IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CSF3 Others Human 人 G-CSF / GCSF 人細胞裂解液 (陽性對照) | CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人慢性髓系白血病細胞;K562 大鼠肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | HSAEpC Pellet 人小氣道上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 人膀胱平滑肌細胞cDNAHBdSMC cDNA |
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5 | 人腦靜脈血管平滑肌原代細胞iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細胞裂解液 (陽性對照) | CL-0437SF763(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
ANGPTL5 Protein Human 重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) | HEL細胞，人紅白細胞白血病細胞 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細胞 成纖維細胞培養(yǎng)基FM-acf |
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PS-1(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OAS2： 2'-5'-寡腺苷酸合成酶2抗體 0.2ml | CA4 Others Mouse 小鼠 Car4 / CA4 / CAIV 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Spindlin 1： 卵巢癌相關(guān)蛋白抗體 0.1ml | Caspase 2： 半胱胺酸蛋白酶-2抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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