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詳細(xì)介紹
人腦成纖維原代細(xì)胞
人腦成纖維細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Human Brain Fibroblast Cells | 組織來(lái)源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7399 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腦成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
原代表皮角化細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-alpha B Crystallin (Ser53)： 0酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml | GM-CSFR alpha： 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CEP128 中心體蛋白128抗體 規(guī)格 0.2ml | PRSS10： 絲酸蛋白酶10抗體 0.1ml |
Anti-NMP22/FITC 熒光素標(biāo)記核基質(zhì)蛋白22抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhì)細(xì)胞源性營(yíng)養(yǎng)因子抗原 0.5mg |
rec Protein G/FITC 熒光素標(biāo)記重組化蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | Myf6： 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 0.2ml |
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml |
人腦膜細(xì)胞裂解物HMCL | CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | JAM3 Others Human 人 JAM3 / JAM-C 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free) 鼠胚胎成纖維細(xì)胞，PA317細(xì)胞 MLA-144細(xì)胞，長(zhǎng)臂猿淋巴瘤 |
U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 | 人腦成纖維原代細(xì)胞PRSS10： 絲酸蛋白酶10抗體 0.1ml |
Tca8113-P160細(xì)胞，人舌癌細(xì)胞系 大腸埃希氏菌O157：H7 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化) | 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4 |
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | B18R Others Vaccinia Virus 牛痘病毒 B18R / B19R 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
hMo-PB-c single donor 人類外周血細(xì)胞來(lái)源的單核細(xì)胞， 10 million 人心臟成纖維細(xì)胞-心室HCF-av | Anti-IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-5受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) 0酸化受體結(jié)合絲蘇激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 9811C11細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,SW1353細(xì)胞 人胚胎心肌組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HEH-2 |
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr754) 0酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL21 Kelch樣蛋白21抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBsAg(立可讀) 乙型肝炎表面抗原 96T | MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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