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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人脈絡膜黑色素細胞先用蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化結合專用培養(yǎng)基篩選法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人脈絡膜黑色素經(jīng)Dopa染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人脈絡膜黑色素原代細胞 | 組織來源 | 脈絡膜組織 |
英文名稱 | Human Choroidal Melanocyte cells | 貨號 | YS-01X7692 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人脈絡膜黑色素細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺有調節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 長梭形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
原代成纖維細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | Neurokinin A： 激肽A抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MDMX MDM2樣P53蛋白結合抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Transthyretin /FITC 熒光素標記轉甲狀腺素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原 0.5mg | Anti-OAS1 寡腺苷酸合成酶-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-FSH-R/FITC 熒光素標記促卵泡刺激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC6A19 依賴鈣交換蛋白6 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Pdx1/FITC 熒光素標記胰十二指腸同源異型盒基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC 熒光素標記0酸化雄激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
PKM Others Mouse 小鼠 PKM2 / OIP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人胚腎細胞;293FT 人腎動脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人腦微血管內皮細胞 | KLK6 Others Human 人 KLK6 / Kallikrein 6 / Neurosin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD36 Others Rat 大鼠 CD36 / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD274 Others Human 人 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) | LTA4H Others Human 人 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256 | 人脈絡膜黑色素原代細胞Anti-OAS1 寡腺苷酸合成酶-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽) |
牛腎細胞;MDBK | TDGF1 Others Human 人 TDGF1 / CRGF 人細胞裂解液 (陽性對照) |
豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4 中國倉鼠體細胞，R 1610細胞 IAR20細胞，大鼠肝細胞 | GIG8： DNA結合抑制因子2抗體 0.1ml |
Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 人類白細胞抗原B27Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) |
間皮素抗體 Anti-MSLN 0.1ml | OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受體 96T |
phospho-AANAT (Thr29)： 0酸化芳香胺N-乙酰化轉移酶抗體 0.1ml | PKM Others Mouse 小鼠 PKM2 / OIP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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