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詳細介紹
人卵巢成纖維原代細胞
人卵巢成纖維細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細胞大多分布于卵巢表面，其主要特點和功能：①成纖維細胞在體外易于培養(yǎng)；②卵巢損傷后，成纖維細胞能修復(fù)和重塑卵巢；③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴散。
英文名稱 | Human Ovarian Fibroblast Cells | 組織來源 | 卵巢組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7221 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人卵巢成纖維細胞
組織來源：卵巢組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
原代單核細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | Anti-TRP1/gp75 酪酶相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶 96T | Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光素標記0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Titin/CMD1G 擴張型心肌病蛋白1G抗體 規(guī)格 0.2ml | eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 規(guī)格 0.2ml |
FADD： Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml | ANG ELISA Kit 大鼠血管生長素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細胞裂解液 (陽性對照) | EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
人腦微血管內(nèi)皮細胞HBMEC | TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Hela S3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM-acf | SERPINA6 Others Mouse 小鼠 SerpinA6 / CBG 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB-3(人Butt淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人脊柱間充質(zhì)干細胞HVMSC | SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒WST | 人卵巢成纖維原代細胞eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
IgG Others Human 人 IgG1-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H110人皮膚肥大細胞培養(yǎng)基100mL |
FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細胞，SK-OV-3[SKOV-3]細胞 BT549(管癌細胞) |
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PS-1/FITC 熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)： 0酸化D型受體抗體 0.1ml | RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CGB5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPINK1/SPINK3： 相關(guān)酶抑制劑1抗體 0.1ml | CD2BP3： CD2結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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