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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢癌組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人卵巢癌組織源原代細(xì)胞 | 組織來源 | 卵巢癌組織 |
英文名稱 | Human Ovarian Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號(hào) | YS-01X7440 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人卵巢癌組織源細(xì)胞分離自患有卵巢癌病人的卵巢癌組織；卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤，是指生長在卵巢上的惡性腫瘤，其中90%～95%為卵巢原發(fā)性的癌，另外5%～10%為其它部位原發(fā)的癌轉(zhuǎn)移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難，就診時(shí)60%～70%已為晚期，而晚期病例又療效不佳。因此，雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌居?jì)D科惡性腫瘤的第三位，但死亡率卻超過宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和，高居?jì)D科癌癥，是嚴(yán)重威脅婦女健康的大疾患。卵巢由于組織學(xué)的特點(diǎn)，其癌的組織學(xué)類型之多居全身各器官。卵巢腫瘤主要的組織學(xué)類型如下：來源于卵巢的生發(fā)上皮，具體類型包括漿液性瘤、粘液性瘤、子宮內(nèi)膜樣瘤、透明細(xì)胞瘤、 纖維上皮瘤（又稱勃勒納瘤）、混合型上皮瘤等。來源于卵巢的生殖細(xì)胞。主要類型有畸胎瘤、無性細(xì)胞瘤、胚胎性癌、內(nèi)胚竇瘤、絨毛膜癌、混合性生殖細(xì)胞瘤。來源于卵巢的特異性性索間質(zhì)，包括顆粒細(xì)胞瘤、卵泡膜細(xì)胞瘤、纖維瘤、卵巢睪九母細(xì)胞瘤、兩性母細(xì)胞瘤等。來源于原發(fā)在其它器官的惡性腫瘤，常見的包括消化道和婦科其它器官。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
MOLT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 MOLT-4 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人激肽B 96T |
RNF43： 環(huán)指蛋白43抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Hck/FITC 熒光素標(biāo)記造血細(xì)胞激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C18orf1： 18號(hào)染色體開放閱讀框1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-CT/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
抗子宮內(nèi)膜抗體 anti-EMAb 0.2ml | phospho-AKT1 (Ser246)： 0酸化蛋白激酶AKT1抗體 0.1ml |
NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 人角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HPT-8細(xì)胞，小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184 | EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) |
大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | WISP1 Protein Human 重組人 CCN4 / WISP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0055Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
AE-2雜交瘤細(xì)胞抗AChE AE-2 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清 | 人卵巢癌組織源原代細(xì)胞C18orf1： 18號(hào)染色體開放閱讀框1抗體 0.2ml |
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 | 5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) |
大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細(xì)胞 Human | 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(傣族);KM9405 | Rabbit Anti-IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GTPBP4/CRFG GTP結(jié)合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白) 規(guī)格 0.2ml | 人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8 |
EXTL3： 多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體 0.2ml | Anti-lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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