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人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-15 08:36:42瀏覽次數(shù):29

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8300 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代真皮成纖維細(xì)胞 低分化鼻咽癌細(xì)胞 英文名稱: CNE-2 SVP VERO細(xì)胞衍生株 1ml/T75 COS-7L, 非洲綠猴成纖維細(xì)胞 H9c2(2-1) 大鼠心肌細(xì)胞 大鼠原代腸巨噬細(xì)胞

詳細(xì)介紹

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

人淋巴結(jié)成纖維細(xì)胞分離自淋巴組織;淋巴結(jié)是呈橢圓形或蠶豆形的淋巴組織小體,大小不一,新鮮時呈灰紅色。穿插于淋巴管的行程中,并與淋巴管相通連。淋巴結(jié)主要由淋巴組織和淋巴竇組成,外面包以致密結(jié)締組織被膜,被膜向淋巴結(jié)內(nèi)伸入,形成許多間隔或小梁,構(gòu)成淋巴結(jié)的網(wǎng)狀支架,并把淋巴結(jié)實(shí)質(zhì)分隔成許多部分。這些結(jié)締組織由成纖維細(xì)胞構(gòu)成,對淋巴管起到保護(hù)和支持作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

英文名稱

Human Lymph Node   Fibroblast Cells

組織來源

淋巴

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X8300

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:人淋巴結(jié)成纖維細(xì)胞

組織來源:淋巴

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGF、Insulin、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

人淋巴結(jié)成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的人淋巴結(jié)成纖維采用混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的人淋巴結(jié)成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of   cells包裝:500/100ml

Orexin A ELISA Kit 大鼠阿立新AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

C1orf168 1號染色體開放閱讀框168抗體   0.2ml

GCN2: 蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh CEP55 中心體蛋白55kDa抗體 規(guī)格 0.2ml

Prostatic Acid Phosphatase: 前列腺酸性0酸酶抗體 0.2ml

Anti-Nociceptin/FITC 熒光素標(biāo)記孤菲肽/痛敏肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mg

IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

(C1F3): 單克隆抗體 0.1ml

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

REG1A Others Human REG1A / PSPS 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA

KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

FOLR1 Others Human FOLR1 / Folate receptor alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GI / TNFRSF18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞   P815 mouse mastocytoma cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞Prostatic   Acid Phosphatase: 前列腺酸性0酸酶抗體 0.2ml

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1 大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1

腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)

LRP11 Others Human LRP11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HREpC-c 人腎上皮細(xì)胞(HREpC) 500,000cells 人小膠質(zhì)細(xì)胞HM

Anti-IL-4R/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素4受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Rho C RhoC抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

BGC-823細(xì)胞,人低分化胃癌細(xì)胞 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,SW038-C2細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8

Rhesus antibody Rh phospho-NFKB   p65(Ser529) 0酸化細(xì)胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml

Rhesus antibody Rh KLHL23 Kelch樣蛋白23抗體 規(guī)格 0.2ml

HBeAg(立可讀) 乙型肝炎e抗原 96T

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 

人淋巴結(jié)成纖維原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。




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