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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人口腔上皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 口腔黏膜組織 |
英文名稱 | Human Oral Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7604 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人口腔上皮細(xì)胞分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞，呈扁平、多邊形，形狀不規(guī)則。口腔各壁都有黏膜覆蓋，口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動。基底層以上是數(shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂增生，以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細(xì)血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 | OPGL(Mouse Osteoprotegerin Ligand) ELISA KIT 小鼠骨保護(hù)素配體 96T |
RASD2： 血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAB6B RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB6B抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-HCFHrp/BTA/FITC 熒光素標(biāo)記抗膀胱抗原IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | COX7A2： 氧化酶VIIA亞型2抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-CSP/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
表皮膜蛋白1抗體 Anti-Emp1 0.2ml | phospho-AKT1/3 (Tyr473)： 0酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml |
U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 | 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞RNAHVT miRNA5 μg |
L-02細(xì)胞，正常肝細(xì)胞 人肺小細(xì)胞肺癌,NCI-H2227細(xì)胞 大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 | 敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1 |
CM-H136人牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 細(xì)胞名稱 種屬 |
MDCK 狗腎細(xì)胞 | CL-0052Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人口腔上皮原代細(xì)胞COX7A2： c氧化酶VIIA亞型2抗體 0.1ml |
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]細(xì)胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纖維細(xì)胞) |
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1 |
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A | Rabbit Anti-IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GTPBP9 核苷酸結(jié)合蛋白9抗體 規(guī)格 0.2ml | 人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4 |
ENO3： 骨骼肌烯醇化酶抗體 0.1ml | Anti-Laminin Beta 1 層粘連蛋白β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 |
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