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人結(jié)腸癌組織源原代細(xì)胞
人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞分離自患有結(jié)腸癌病人的結(jié)腸癌組織；結(jié)腸癌是常見的發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤，好發(fā)于直腸與乙狀結(jié)腸交界處，以40～50歲年齡組發(fā)病率高，男女之比為2～3：1。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結(jié)腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀、潰瘍型等。結(jié)腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展，沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤(rùn)，除經(jīng)淋巴管、血流轉(zhuǎn)移和局部侵犯外，還可向腹腔內(nèi)種植或沿縫線、切口面擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。慢性結(jié)腸炎患者、結(jié)腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用。
英文名稱 | Human Colon Cancer Tissue-Derived Cells | 組織來源 | 結(jié)腸癌組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7431 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞
組織來源：結(jié)腸癌組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人結(jié)腸癌組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
Neuro-2A細(xì)胞，腦瘤細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HepG2.2.1.5細(xì)胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | Rhesus antibody Rh GIDRP88 生長(zhǎng)抑制和分化相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
PEDF(Human pigment epithelium-derived factor) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | FITC FITC標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml |
IL-10： 白細(xì)胞介素10抗體 0.1ml | CRP ELISA Kit 大鼠C反應(yīng)蛋白 96T |
Rhesus antibody Rh RING1 環(huán)指蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAG-3/CD223/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞活化基因-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 0酸化NF-κB活化激酶抗體 規(guī)格 0.1ml | IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit 人白介素23 96T |
黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR | Lec1 倉鼠卵巢細(xì)胞 |
CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | A549, 人肺癌細(xì)胞系 |
Hep 3B 人肝癌細(xì)胞 | TNFSF8 Protein Human 重組人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 | 纖維粘連蛋白-牛源BPF |
SV-HUC-1人輸尿管上皮永生化細(xì)胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培養(yǎng)基+10%FBS | 人結(jié)腸癌組織源原代細(xì)胞CRP ELISA Kit 大鼠C反應(yīng)蛋白 96T |
BGC-803 人胃癌細(xì)胞 | KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 | Rhesus antibody Rh APOH 載脂蛋白H抗體 規(guī)格 0.1ml |
beta 3 Adrenergic Receptor： β3能受體抗體 0.1ml | 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2 |
Anti-VAMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PEA3： 瘤促活化因子3抗體 0.2ml |
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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