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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人骨髓單核原代細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Human Bone Marrow Monocyte Cells | 貨號 | YS-01X7559 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%，被認為是破骨細胞的前體細胞，較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高、全骨髓誘導法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多，純度高，較脾細胞誘導法分化效率高。骨髓單核細胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型。目前，大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
FRhK-4恒河猴胚腎細胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | Rhesus antibody Rh GilZ/TilZ 糖皮質激素誘導亮拉鏈蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗親和素 0.1ml |
IL1RAPL1： 白介素1受體相關蛋白樣1前體蛋白抗體 0.1ml | Cry Beta(Human crystal proteins Beta) ELISA Kit 人晶體蛋白β 96T |
Rhesus antibody Rh RIP1 受體相互作用蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-TERT(Ser1125) 0酸化端粒酶逆轉錄酶抗體 規(guī)格 0.1ml | dsDNA ELISA Kit 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 96T |
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽) | 3T3? 成纖維細胞 |
CL-0255A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 |
人腎癌Wilms細胞;G401 | 人B淋巴母細胞;HMy2.CIR |
大鼠皮下脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | 抗霉菌溶液ABAMS |
貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-) 整合SV40基因的上皮細胞，HBL-100細胞 CCC-SMC-1細胞，兔主動脈平滑肌細胞 | 人骨髓單核原代細胞Cry Beta(Human crystal proteins Beta) ELISA Kit 人晶體蛋白β 96T |
肺大靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | A3(人T淋巴細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 子宮癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml |
TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
倉鼠腎細胞;HL-1 | Rhesus antibody Rh Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
BK channel： 鈣激活通道蛋白α1抗體 0.2ml | 水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) |
Anti-Smac/DIABLO/FITC 熒光素標記線粒體促凋亡蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PSA (PA5)： 鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測) 0.1ml |
Anti-CD146(MCAN)/FITC 熒光素標記抗黑色素瘤細胞粘付分子CD146抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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