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詳細(xì)介紹
人肝動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞
人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動(dòng)脈供血，分別來源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈，這3條動(dòng)脈分別的不同部位。出生后，一般保留一條動(dòng)脈，大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈，由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況，如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈（25%），起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈（10%），而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí)，此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈，如果在常見肝動(dòng)脈類型外，還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流，這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肝動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長(zhǎng)潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素，新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng)，并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。
英文名稱 | Human Hepatic Artery Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肝動(dòng)脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7180 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
組織來源：肝動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
原代系膜細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | GR- Alpha ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf183： 1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體 0.2ml | Phospho-Gab1 (Tyr627)： 0酸化接頭蛋白Gab 1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CFHL1 補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | PGC1 beta： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml |
Anti-CD337/NKp30/NCR3/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞毒性受體NK-p30抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原 0.5mg |
Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | Phospho-MAP3K8 (Ser400)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml |
CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | BCAM Others Human 人 BCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人膀胱平滑肌細(xì)胞總RNAHBdSMC NA | IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MBL1 Others Mouse 小鼠 MBL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞 RM-1 mouse prostate cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;HL-1 | 人肝動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞PGC1 beta： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml |
CV-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,SW116細(xì)胞 CM-H133人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2 |
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1 | FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MDA-MB-415(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NRK(大鼠腎細(xì)胞) | Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RELMa 抵抗素樣分子α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-Gab1 (Tyr659) 0酸化接頭蛋白Gab 1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml |
FT4 游離T4 96T | CDK16 Others Human 人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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