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詳細介紹
人肺大靜脈平滑肌原代細胞
人肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應，保持靜脈管腔的通暢，還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞。
英文名稱 | Human Pulmonary Great Vein Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肺靜脈組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7017 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人肺大靜脈平滑肌細胞
組織來源：肺靜脈組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
雜交瘤(B類);C3110D2E11 | IKB beta： 核因子κB抑制蛋白β抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Megsin 絲蛋白酶抑制劑B7抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-TRA16 /FITC 熒光素標記激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TRAF1 壞死因子受體相關因子1抗原 0.5mg | Anti-MT-ND1 NADH復合體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009) /FITC 熒光素標記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-APS(Ser598)/FITC 熒光素標記0酸化APS抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CD200R1 Others Human 人 CD200R1 / CD200R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人胚肺成纖維細胞;HFL-I | 大鼠少突膠質前體細胞(ROPC)(5×105) |
KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2 艱難梭菌Closidium difficile | SERPINB2 Others Human 人 SerpinB2 / PAI-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
EL4(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎細胞;104C1 | FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
腸動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人肺大靜脈平滑肌原代細胞Anti-MT-ND1 NADH復合體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 |
腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SP2/0細胞，骨髓瘤細胞 人經(jīng)典小細胞肺癌細胞,NCI-H1688細胞 CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 | GLUT12： 葡萄糖轉運蛋白12抗體 0.2ml |
Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 人2,3Dinor血栓烷B2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IFNW1 Others Human 人 IFN omega 1 / IFNW1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
壞死因子受體相關因子6抗體 Anti-TRAF6 0.2ml | PCT(Human Procalcitonin) ELISA Kit 人降鈣素原 96T |
ACADL： 酰基脫氫酶長鏈抗體 0.1ml | MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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