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詳細介紹
人肺癌組織源原代細胞
人肺癌組織源細胞分離自癌組織；癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見的一類。相對應的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關。癌細胞，是一種變異的細胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外(能進行多極分裂)，還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
英文名稱 | Human Pulmonary Cancer Tissue-Derived Cells | 組織來源 | 肺癌組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7458 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人肺癌組織源細胞
組織來源：肺癌組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
方法簡介
普諾賽實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
普諾賽實驗室分離的人肺癌組織源細胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
HBL-100人整合SV40基因的上皮細胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠酶2 96T |
ROR beta： 維相關孤兒受體β抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml |
Anti-HAI-1/FITC 熒光素標記肝細胞生長因子激活物抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CERKL： 視網(wǎng)膜色素變性蛋白26抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 丙肝病毒NS5A反轉錄蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標記畸胎瘤衍化生長因子抗體(表皮生長因子相關肽)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
人瘤病毒16型E7抗體 Anti-E7 protein 0.1ml | Anterior Gradient 2： 前梯度同源蛋白2抗體 0.1ml |
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標簽) | 人腎實質細胞培養(yǎng)基 100mL |
SRSV/3T3細胞，小鼠SRSV轉化的3T3細胞 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9402 | CXCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽) |
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS | A2(人腺樣囊性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
LLC 小鼠肺癌細胞 | CL-0032BEL-7404(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
293E細胞，穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞 中國倉鼠卵巢細胞,CTLA4 Ig-24細胞 CL-0286M1(小鼠白血病細胞)5×106cells/瓶×2 | 人肺癌組織源原代細胞CERKL： 視網(wǎng)膜色素變性蛋白26抗體 0.2ml |
大鼠紋狀體元RN-s | CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清 |
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 普通變形桿菌 | IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標簽) |
人胚肺二倍體細胞;KMB-17 | IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh H Cadherin/CDH13 心臟鈣粘蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | 人臍靜脈內皮細胞cDNAHUVEC cDNA |
phospho-E2F1 (Ser332)： 0酸化轉錄因子E2F-1抗體 0.1ml | Anti-LILRB3/CD85a/PirB 白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細胞周期素D2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標簽) |
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