化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脂肪間充質(zhì)干原代細胞 | 組織來源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Rat Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7592 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞，簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠血管生成素2(ANGPT2)試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit
Mouse prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/粒細胞膠原酶(MMP-8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanBeta-glucosidaseELISAKit人β葡糖苷酶
細胞DYRK1A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitFASL大鼠凋亡相關(guān)因子配體
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAlpha-fetoprotein,AFP試劑盒人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 96T/48T
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 96T/48T
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)試劑盒 96T/48T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒 96T/48T
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
GC-1, 鼠精原細胞 Mouse A2780(人癌細胞) 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells 小鼠原代骨骼肌細胞 小鼠原代小腸隱窩上皮細胞
大鼠脂肪間充質(zhì)干原代細胞信號素5B(SEMA5B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)
CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標簽)
TREM1重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
LDLRAD3重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)