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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠胰島經(jīng)DTZ染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胰島原代細胞 | 組織來源 | 胰腺組織 |
英文名稱 | Rat Pancreatic Islet Cells | 貨號 | YS-01X7067 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠胰島細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%，每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀，具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點，是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟，分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)試劑盒 ，英文名： MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人補體片斷3a
細胞CASEINKINASE1δ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitOFQ/N大鼠孤腓肽
小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCalretinin,CR試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ，IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit ELISA.
兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit ELISA.
HSPB1重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白 Protein
腎素(REN)重組蛋白 Recombinant Renin (REN)
MAPK14重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 標(biāo)簽) Protein
CTHRC1 Protein Human 重組人 CTHRC1 蛋白
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽) NCI-H661(人大細胞肺癌細胞) 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞;HK-2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細胞 Li-7人肝癌細胞 Li-7 human 小鼠原代海綿體平滑肌細胞 人原代肝門靜脈成纖維細胞
大鼠胰島原代細胞CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase 0.5mgCNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型尿肽抗原
ANXA5 Protein Human 重組人 ANXA5 / Annexin Ⅴ / Annexin A5 蛋白
ACVRL1重組小鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IL13RA2 Protein Mouse 重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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