大鼠外周血樹突狀原代細胞(成熟DC細胞)公司出售的產品：小鼠原代肝實質細胞 D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞) Caov-3 人癌細胞 1ml/T75 NRK-49F 大鼠正常成纖維細胞 MOLT-4 人急性淋巴母細胞白血病細胞 人原代乳腺癌組織源細胞

大鼠外周血樹突狀原代細胞(成熟DC細胞)

大鼠外周血DC細胞分離自外周血，由外周血單核細胞誘導而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞，典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內細胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成，多數呈懸浮生長， 細胞呈圓形，細胞體積進一步增大，表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志，主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答，不能激活T細胞的第二信號，可導致T細胞無能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。

產品名稱：大鼠外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)

組織來源：外周血

產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細胞形態(tài)：圓形，樹突狀

傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠外周血樹突狀經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠脂素1(LPIN1)試劑盒 ，英文名： LPIN1 ELISA Kit

Mouse soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒

MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanHMGB-1ELISAKit人高遷移率族蛋白B1ELISAKit

B2高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitGDNF大鼠膠質細胞系來源的營養(yǎng)因子

小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 9/ gelatinase B (MMP-9/G 大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/G

Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISAKit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Hamstermaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAK倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞染色質免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次

MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性細胞間粘附分子-1   英文名稱：   Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1   規(guī)格：      英文縮寫：   sICAM-1

小鼠干擾素-α   英文名稱：   Ierferon α   規(guī)格：      英文縮寫：   IFN-α

小鼠干擾素-β   英文名稱：   Ierferon β   規(guī)格：      英文縮寫：   IFN-β

小鼠干擾素-γ   英文名稱：   Ierferon γ   規(guī)格：      英文縮寫：   IFN-γ

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD72分子(CD72)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

AZGP1重組人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)

CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

DLD-1細胞，人結直腸腺癌上皮細胞 人視網膜母細胞瘤,Y79細胞 人導管癌細胞;ZR-75-30  SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細胞裂解液   rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞) 小鼠原代腦動脈血管內皮細胞 大鼠原代腎臟巨噬細胞

大鼠外周血樹突狀原代細胞(成熟DC細胞)ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原

CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白

EGF重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein

FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽)

IFNG重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。