大鼠腎小球系膜原代細胞

大鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質，由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞，具有分泌細胞基質、產生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節(jié)，以影響毛細血管袢的內壓和濾過率；②支持作用，它填充于毛細血管袢之間，支持毛細血管的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質；④分泌腎素，在腎缺血或免疫復合物沉積時，系膜細胞增生且分泌腎素。

產品名稱：大鼠腎小球系膜細胞

組織來源：腎組織

產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腎小球系膜采用機械研磨法結合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腎小球系膜經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠轉膠蛋白(TAGLN)試劑盒 ，英文名： TAGLN ELISA Kit

Mouse ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒

Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanLeishimariaaibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體

脘蛋白基因變異分析試劑盒20次

ELISAKitEMAIgA大鼠抗肌內膜抗體IgA

小鼠P物質(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質類固醇受體(GR)試劑盒

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-Ag試劑盒人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>8(HDAC8)活性比色法定量試劑盒20次

humaESTcorepressor3,RCOR3ELISAKit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒   兔纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒、兔纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒、兔糖化血紅蛋白A1c 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔胎盤生長因子試劑盒   兔胎盤生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔胎盤生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔胎盤生長因子試劑盒、兔胎盤生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標簽)

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)

CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)  HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液   EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932 小鼠原代韌帶成纖維細胞 人原代臍動脈平滑肌細胞

大鼠腎小球系膜原代細胞Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。