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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠前列腺上皮采用先蛋白酶消化、后膠原酶-聯(lián)合消化并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠前列腺上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠前列腺上皮原代細胞 | 組織來源 | 前列腺 |
英文名稱 | Rat Prostate Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7245 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠前列腺上皮細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關系密切，上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內可檢測到脫落的上皮細胞，這是上皮細胞損傷的標志。炎癥發(fā)生時，與炎癥相關的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎。前列腺主要特征如下：①前列腺結構和功能活動均受雄性激素的調控；②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞；③前列腺上皮細胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學和激素性致癌作用提供了機會。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA 試劑盒
Human ansfer factor (TF) ELISA Kit 人轉移因子(TF)試劑盒
Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 人胸苷酸合成酶(TS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanIerleukin17,IL-17試劑盒人白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humaniestinalfattyacidbindingprotein，iFABPELISAKit人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒
HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanchondroitinsulfate,CS試劑盒人軟骨素(CS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
總乳酸待測樣品處理試劑盒20次
HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISAKit人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人孕激素/孕(PROG)試劑盒 96T/48T
人原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒 96T/48T
人(Protamine)試劑盒 96T/48T
人誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 96T/48T
PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein
Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白
SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein
CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標簽)
NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
CM-R019大鼠腮腺細胞人扁桃體上皮細胞HTEpiC Ishikawa, 人子宮內膜癌細胞系 胚肺細胞,2BS細胞 SNU-398(人肝癌細胞) MDCK 狗腎細胞 MIN6 小鼠胰島素瘤細胞 大鼠條紋神經元(RNs)(1×106) 小鼠原代腎盂輸尿管連接處cajal間質細胞 兔原代睪丸內膜成纖維細胞
大鼠前列腺上皮原代細胞TSFP1/SP1(transcription factor Sp1 0.5mgTSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉錄生長因子抗原
ITIH3 Protein Human 重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)
G-250蛋白質印跡膜快速染色試劑 2*100ml
IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白
MAPK8重組人 JNK1 / MAPK8 蛋白 (GST 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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