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大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-13 15:37:55瀏覽次數(shù):25

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7351 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 NCI-N87(人胃癌細(xì)胞) EA.hy926 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞 1ml/T75 KYSE410 人食管癌細(xì)胞 22RV1 人前列腺癌細(xì)胞 兔原代胰腺星狀細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腦微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠腦微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

組織來源

腦組織

英文名稱

Rat Brain   Microvascular Endothelial Cells

貨號

YS-01X7351

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細(xì)胞簡介:

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦組織;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細(xì)胞旁的通量;②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

Human ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人原激活肽(TAP)試劑盒

Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanglathione,GSH試劑盒人(GSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織單胺氧化酶B(MAO-B)活性熒光定量試劑盒20

Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物血凝素/凝集素(PHA)試劑盒

Human ai calpastatin aibody (ACAST-D IV) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-D)試劑盒

PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit 豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFP-L3(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3

血液A高效液相色譜法定量試劑盒20

MouseThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit小鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒

(HYD)ELISAKit   ELISA. 

(NO)ELISAKit   ELISA. 

豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA. 

豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit   ELISA.

IL18R1重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ING5 Protein Human 重組人 ING5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)  CD97 Others Human CD97 人細(xì)胞裂解液   MVK Others Human MVK / Mevalonate kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   PTPN12 Others Human 小鼠原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 小鼠原代腎小球系膜細(xì)胞

大鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)

ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein




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