詳細(xì)介紹
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌原代細(xì)胞
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織;腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán);靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈;各級(jí)靜脈都沒(méi)有瓣膜。它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
英文名稱 | Rat Brain Artery Vascular Smooth Muscle Cells | 組織來(lái)源 | 腦動(dòng)脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7337 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源:腦動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒
Plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒
Humansteroidcellaoaibody,SCAELISAKit 人抗類固醇細(xì)胞抗體(SCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanFcregionofimmunoglobulinG,Fcγ試劑盒GFc片段(Fcγ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織WEE1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
humannuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cellsinhibitorepsilon,Nfkbie人B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,英文名: IL4 ELISA Kit
Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒
rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素
線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000倍)20微克
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T6細(xì)胞 ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21 小鼠原代小腸粘膜上皮細(xì)胞 兔原代腎臟巨噬細(xì)胞
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌原代細(xì)胞TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽
IL3 Protein Human 重組人 IL3 / IL-3 蛋白
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
PARP1重組人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein